疫苗干货第八篇：DNA污染物
Track C
本文介绍三个科学家先后发现mRNA针剂包含DNA污染物的经过，以及污染物的成因和后果。
Dr. Kevin McKernan首次发现
2023年初，麻省理工的基因组学科学家Dr. Kevin McKernan，意外发现辉瑞和摩德纳针剂中包含质粒DNA的微小片段污染。在该领域拥有25年经验的McKernan，决定再做一次实验，他发现这些小瓶中的DNA污染程度比欧洲药品管理局(EMA)和美国食品和药物管理局(FDA)允许的法定限值高出18-70倍。
令他震惊的是，他在Pfizer疫苗瓶中发现了SV40启动子，SV40是致癌的猿猴病毒。 Dr. McKernan解释说，这一序列的作用是“将DNA驱动到细胞核中，尤其是在基因治疗中。” 然而，世界各地的监管机构曾经明确表示，mRNA疫苗绝不可能改变基因。
McKernan意识到制造商在监管过程中没有披露污染情况，他于6月向FDA提交了他的研究结果，至今未收到FDA对此事的任何回应。
Dr. Phillip Buckhaults确认
其他科学家很快证实了McKernan的发现，但是他们检测出的DNA污染量存在差异，表明不同批次的针剂污染程度不一致。其中一位科学家是癌症基因组学专家、南卡大学教授Dr. Phillip Buckhaults，他于本月在南卡罗来纳州参议院医疗事务委员会做证，他发现辉瑞的mRNA针剂被数十亿个微小DNA片段污染。他告诉在场的人，“我对疫苗中的DNA成分感到担心——它与RNA不同，因为它可以是永久性的。这是一个非常现实的危险，” 他说，污染的DNA片段会与人的基因组整合，并成为“细胞的永久固定物”，导致一些接种疫苗的人出现自身免疫问题和癌症。他还指出，这些基因组变化可以“持续几代人”。
Buckhaults博士声称，mRNA针剂中存在高水平的污染DNA“可能会导致一些罕见而严重的副作用，例如心脏骤停导致的死亡”机制。 他补充说，“我认为联邦层面需要重视对此的监管。” Buckhaults博士曾经是mRNA针剂的支持者，他此前已经接种了三剂Pizer针剂，但是如今他最担心的是“理论上，某些人未来患癌症的风险非常真实，这取决于外来DNA片段在基因组中的位置，它可能会中断抑癌基因或激活癌基因。”
Dr. Kirchner和Dr. König再次确认
德国生物学家Jürgen O. Kirchner和医学微生物学、病毒学教授Brigitte König复制了美国科学家Kevin McKernan和Phillip Buckhaults的发现，在辉瑞疫苗母国德国部署的BioNTech mRNA疫苗小瓶中同样存在大量DNA污染。尽管在德国境外通常被称为“辉瑞”疫苗，但该针剂实际上是由德国公司BioNTech开发的。辉瑞公司生产的mRNA成品供美国，而BioNTech本身则负责与欧洲分包商合作生产供欧盟供应的mRNA。然而，这似乎并没有对DNA污染问题产生任何影响。
Dr. Kirchner购买了五瓶未开封的BioNTech疫苗，交给莱比锡大学医院Dr. Brigitte König教授位于马格德堡的实验室进行分析。König教授发现五瓶针剂均包含大量DNA污染物，最多一瓶比世界卫生组织建议的、适用于欧盟的每剂量10纳克限值高出354倍。与MIT教授Kevin McKernan一样，她也发现了完整残留的细菌质粒。Kirchner致信德国监管机构保罗·埃利希研究所(PEI)，信中呼吁应当“立即将BioNTech的 Comirnaty mRNA疫苗撤出市场”。König教授的分析结果如下，
DNA污染的成因
在南卡听证会上，Dr. Buckhaults通过对比两种不同的生产辉瑞疫苗的制作工艺，解释了DNA污染的来源。
辉瑞新冠疫苗的最初生产，使用了一种称为聚合酶链反应(PCR)的方法来扩增DNA模板，然后将其用于生产mRNA，这种方法可用于制备高纯度的mRNA产品，称为1号流程(PROCESS 1)。但是为了扩大向人群大规模分发疫苗以实现“紧急授权”供应的流程，辉瑞公司改用了另一种方法来扩增mRNA，即2号流程(PROCESS 2)。该方法使用细菌制造大量“DNA质粒”(环状DNA指令)，用于制造mRNA。 因此，最终产物含有质粒DNA和mRNA。
然而，2号流程仅仅适用于传统疫苗的生产，因为其成分“裸DNA(Naked DNA)”在进入细胞内部之前就会被组织酶消化，所以DNA片段不会对人体构成威胁。然而，辉瑞和摩德纳mRNA针剂里的DNA并不是“裸露的”，它们包裹在脂质纳米颗粒 (LNP)中。这种脂质颗粒说是保护RNA传达指令，帮助身体产生抗体，但实际是给有害物质穿上了防弹衣，使得遗传物质DNA可以畅通无阻地迁移到细胞核，并将自身插入到基因组中。
疫苗厂商无论是由于赚钱心切，还是其他不可告人的目的(下文会继续讨论)，把1号流程切换到2号流程，这一变动都导致了疫苗被污染。⬇️
辉瑞公司为了规避检查出DNA污染超标，就在针剂中添加了酶(DNAse)将质粒切割成数百万个微小片段，试图掩盖DNA污染的问题。但Buckhaults教授表示，这让情况变得更糟，因为片段越多，其中一个片段插入基因组并破坏重要基因的机会就越大，“辉瑞将它们切碎，试图让DNA片段消失，但它们实际上增加了在此过程中基因组修改的危险。” 他表示再加上另一个环节去除这些污染也不是很贵，言下之意是疫苗厂商没有把品控当回事。
BMJ的一项调查发现，源自2号流程生产的批次疫苗的mRNA完整性明显较低，似乎发生疫苗副作用的概率更高。⬇️
DNA污染的危害
让我们看看FDA以往给疫苗厂商关于DNA残留的意见是如何写的：
“由于潜在的致癌性和/或传染性，残留DNA可能会对您的最终产品构成风险。残留DNA可能通过多种潜在机制致癌，包括编码癌基因的整合和表达或DNA整合后的插入突变。 如果存在逆转录病毒原病毒、DNA病毒的整合拷贝或染色体外基因组，残留的DNA也可能能够传播病毒感染。” https://www.fda.gov/media/78428/download
归纳起来就是残留DNA促癌和逆转录。
先说促癌。如果你记性好的话，应该还记得笔者在《后天免疫(上)》一文中，介绍了针剂引发的免疫球蛋白抗体类别转换，可能导致癌症复发。《后天免疫(下)》一文中，介绍了针剂引导人体产生的刺突蛋白阻碍了BRCA1和53BP1这两种抑癌基因主导的免疫系统修复机制。现在针剂中发现存在的SV40序列的片段，也是促癌，原理如下。
前几日的南卡听证会上，另一位经常担任专家证人的毒理教授Dr. Jance Lindsay对针剂中存在SV40片段的做出了如下评价。
“质粒中存在未向监管机构披露的SV40序列……如果你还记得的话，SV40病毒是脊髓灰质炎疫苗的污染物。这种致癌病毒的污染导致了未来几十年内接受这些疫苗的人们患上许多癌症。疫苗中不包含完整的SV40病毒，只有一个特殊的序列，称为核定位序列，它的作用是把质粒直接带入人体细胞的细胞核。要知道，制作疫苗并不需要在细菌中培养SV40，以达到他们号称的为了制作大量副本的目的。反而该序列会将DNA带到人类细胞的细胞核中，然后在那里进行整合。因此，所有关于'注射液中没有DNA，它们不会进入细胞核，它们不会与你的 DNA 整合'的说法都是错的，他们从一开始就知道疫苗里含有质粒。FDA知道这种污染，但是他们什么也没做。这太离谱了。在我的整个职业生涯中，我从未见过这样的事情。我们必须禁止给儿童注射这些受污染的危险致命产品。”
Dr. Lindsay认为疫苗厂商在针剂中放入SV40序列是出于“邪恶的意图”。共和党州参议员Billy Garrett请她解释何为邪恶的意图，Dr. Lindsay回答说：“SV40序列不应该出现在疫苗里。他们不需要在细菌中培养SV40，我认为这不是意外，因为他们完全可以选择另一种没有SV40序列的质粒。如果这些序列散落在癌基因之上，这意味着它们很可能比其他基因插入物更容易整合到某些部位，从而导致癌症。插入突变无论如何都会导致癌症，这就是风险。你们知道基因疗法为何多年来没有推向市场吗？就是因为插入突变存在致癌风险。”
再说逆转录。前文FDA给苗商的意见里提到了“逆转录”，发生机制见我另一篇长文《mRNA与逆转录》。⬇️
现在怎么办？
Dr. Buckhaults建议接种疫苗的人接受测试，查看是否有任何外源DNA整合到了他们干细胞的基因组中。他说这很容易检测到，因为外源DNA具有独特的特征，就像一张“名片”。他介绍说，进行此类测试并不是非常昂贵，但必须有一个保护医生的系统，让他们不会因为得出与党派路线相悖的结果而受到惩罚。
Dr. Lindsay强调，现在有无毒的替代疗法(伊维菌素)可用于治疗新冠病毒，就应当立即禁止有毒的mRNA疫苗。她恳求南卡州的立法者保护其公民，保护儿童，成为第一个禁止毒针的州，为别的州做出榜样。
【全文完】